江凡看着宋鉴秋认真说道:「宋队,您听过PCT压力循环技术和微流控技术吗?」
宋鉴秋愣了愣,他擅长的是尸体检验和解剖,对于DNA提取方面,虽然懂,但不尖。
江凡看着他的模样,也知道他不太了解,顿时摘下手套,拿起一旁的笔和纸,在上面写写画画。
「宋队,您看,这两项DNA提取技术是今年刚突破的,且是最有代表性的。」
「所谓的压力循环技术,也就是PCT,内核原理是利用快速、周期性的压力变化,来破坏细胞或组织样本的结构。」
「从而释放出DNA。这种压力变化会导致细胞膜、细胞核膜等破裂,同时避免了过度加热对DNA的破坏。」
「这种技术优势在高效提取常见的微量样本,如拭子、毛发、骨骼碎片,PCT能更充分地破碎样本基质,提高DNA回收率,相比如Chelex提取法,产量可提升30%以上。」
「而且还可以选择性提取混合样本,在一般性侵犯案件中,样本通常是精子和阴道上皮细胞的混合物。」
「我们可以通过调节压力参数,PCT可优先破碎细胞膜较脆弱的阴道上皮细胞,先提取女性DNA。」
「再通过更高压力或化学试剂辅助,破碎精子细胞,单独提取男性DNA,实现男女DNA的分离提取,减少混合样本中DNA的干扰,提高检测准确性。
「最后就是可以减少抑制剂残留,在一般的传统提取方法中,样本中的杂质,如血红蛋白、土壤成分,可能残留并抑制后续PCT扩增。」
「PCT通过压力循环促进杂质与DNA分离,降低抑制剂影响,尤其适用于降解样本或污染严重的样本。」
「举个简单的例子,就像埋尸现场的骨骼样本。
宋鉴秋看着江凡画的一些原理图,入了神,等回过神来后,催促说道:「听明白了,赶紧说那个微流控技术!」
「所谓的微流控技术,内核原理是微流控技术是在微米级的芯片信道内,操控微量液体进行样本处理、反应和检测的技术。」
「目前一些地方的法医室已经年开发的集成化微流控平台,将『DNA提取-扩增-分离-检测』等步骤集成到一块小型芯片上,实现DNA分析的自动化和微型化。」
江凡忽然擡起头,「这个我就不说太多了,反正咱们这里没有专门的设备。我感觉我可以再试试用PCT压力循环技术。」
宋鉴秋毫不犹豫说道:「行,那就用这个烟头再试试你所说的PCT!」
他是个好学的人,第一次听到这种方法,有点迫不及待地想看看。
江凡暗自撇了撇嘴,得亏自己是选择高级技能,有2次体验次数,不然的话就亏大了。
PCT压力循环技术与Chelex-100提取法,前期的步骤基本一致,只是多了一个内核步骤,也就是压力循环处理。
但很快江凡就遇到一个问题了,这里并没有专门的PCT专用管。
思量了两分钟,他决定自己手搓改造一个出来,难度并不大,将检验室其他管稍微改造一下就行。
随后江凡选择了了低压阶段0-50P、高压阶段1000-1500P的压力范围,全程保持在27.5摄氏度下,循环30次。
循环周期为高压维持30秒,低压维持10秒,单次循环40秒,最后启动PCT进程,将反应管放入压力循环仪中,运行设置参数,通过周期性压力变化破碎滤嘴纤维结构、释放包裹的DNA。
在江凡一顿操作猛如虎情况下,时间不知不觉来到了半夜三点。
一直目瞪口呆的宋鉴秋见提取完毕,连忙上前查看具体情况,不查不知道,一查吓一跳。
只见这个用PCT压力循环技术提取出来的DNA回收率比上一种方法足足高了百分之五十!
而且在结果稳定性上和后续的PCR适配性上,都要比Chelex-100提取法要高不少!
「走!」
宋鉴秋忽然拉着浑身疲倦的江凡冲出检验室,刚出门,发现窗外一片漆黑,这才反应过来,现在是半夜。
但他可管不了那么多,直接掏出手机准备给许砚舟打个电话。
江凡见状,疑惑问道:「这时候打过去不太好吧?」
宋鉴秋笑了笑,「你还是没有理解这个案件在许大内心的分量,又或者说还没理解他这个人。」
「别说这时候打过去不大好,就算现在让他过来连轴干三天三夜,他百分百也会愿意。」
